流式细胞仪工作原理 流式细胞仪工作原理示意图

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于流式细胞仪工作原理的问题，于是小编就整理了1个相关介绍流式细胞仪工作原理的解答，让我们一起看看吧。

1. 流式细胞仪原理？

流式细胞仪原理？

流式细胞仪的工作原理是：将待测细胞经特异性荧光染料染色后放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。

这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过模/数转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，也可以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。

检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或***通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双参数或多参数数据，既可以单独显示每个参数的直方图，也可以选择二维的三点图、等高线图、灰度图或三维立体视图。

细胞的分选是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。在流动室的喷口上配有一个超高频电晶体，充电后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待测定细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充以正负不同的电荷，当液滴流经带有几千伏特的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落入各自的收集容器中，不予充电的液滴落入中间的废液容器，从而实现细胞的分离。对分选出的细胞可以进行培养或其它处理，做更深的研究。

流式细胞仪（Flowcytometry）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。

多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节分辨率为零。

流式细胞仪，样品细胞和荧光染料是流式细胞术的三大要素，流式细胞仪根据功能的不同分为分析型流式细胞仪和分选型流式细胞仪，前者只能流式分析，而后者能够同时进行流式分析和分选目标细胞。

流式细胞术检测的对象是呈独立状态悬浮于液体中的细胞，不能直接检测组织块中的细胞，必须先用各种方法将脏器或者组织制备成为单细胞悬液，然后标记上荧光素偶联抗体，才能够被流式细胞仪检测；流式细胞术可以定量检测样品细胞的物理化学特征，其定量是以光信号为基础的，通过分析接收到的激光照射到细胞后的散射光信号和荧光信号完成定量分析。

到此，以上就是小编对于流式细胞仪工作原理的问题就介绍到这了，希望介绍关于流式细胞仪工作原理的1点解答对大家有用。